人们从红色面包霉(Neurospora)中克隆了β-tubulin基因。下图为一大肠杆菌质粒载体pBR的图谱。请你详尽列出从真菌Podospora中克隆同样基因的实验步骤。
简述双脱氧链终止法测定DNA碱基序列的原理。根据下列图谱给出被测定链的基因序列和方向。
人们从红色面包霉(Neurospora)中克隆了β-tubulin基因。下图为一大肠杆菌质粒载体pBR的图谱。请你详尽列出从真菌Podospora中克隆同样基因的实验步骤。
某一家系具有一常染色体显性遗传病,该疾病通常在40岁以后发病。从每一个家庭成员提取DNA样品,用限制性内切核酸酶TaqI消化并进行电泳分离。用已克隆到质粒中的人的DNA片段为探针,放射性标记后进行Southern杂交。结果如下:
全面分析DNA变异、探针DNA及致病基因之间的关系。
所有的家庭成员都具有5kb带;6个患者中的5个具有3和2kb的带,但非患者均不具有,因此这些片段与疾病基因顺式连锁。
基因D编码一个对肌肉发育十分重要的酶。以下为对两个小孩的研究结果。
小孩1:
小孩2:
基因的表达正常,但活性大大降低,说明可能发生了突变,从而影响酶活性。
某一家系具有一常染色体显性遗传病,该疾病通常在40岁以后发病。从每一个家庭成员提取DNA样品,用限制性内切核酸酶TaqI消化并进行电泳分离。用已克隆到质粒中的人的DNA片段为探针,放射性标记后进行Southern杂交。结果如下:
你如何解释最后一个男孩的结果?最后一个男孩可能是致病基因与RLFP座位间发生交换,导致一染色体具有D和5kb片段。
一环形的细菌质粒pBP1具有一四环素抗性基因(tetr),该基因中存在HindIII酶切位点。果蝇的基因组DNA经HindIII消化后用pBP1构建基因文库。菌落原位杂交显示克隆15含有目的基因。利用HindIII和EcoRV对该克隆进行限制性内切酶分析,对照为空的pBP1质粒。下图为电泳图谱,单位为kb。问:
以目的基因为探针进行杂交,预期哪几条为阳性条带
所有2.5kb、1.5kb、1kb以及EcoRV消化的克隆15产生的4.5 kb和3kb均呈现阳性。
某一家系具有一常染色体显性遗传病,该疾病通常在40岁以后发病。从每一个家庭成员提取DNA样品,用限制性内切核酸酶TaqI消化并进行电泳分离。用已克隆到质粒中的人的DNA片段为探针,放射性标记后进行Southern杂交。结果如下:
你如何利用该结果对该家庭成员进行遗传咨询服务
由于3kb和2kb片段与致病基因连锁,这些片段的存在可以作为该疾病的标志,但产前诊断必须考虑交换的问题。
基因D编码一个对肌肉发育十分重要的酶。以下为对两个小孩的研究结果。
小孩1:
小孩2:
某个转基因载体结构,卡那霉素抗性选择标记基因旁边紧密连锁着目的基因(抗冻基因)。用该结构转化烟草叶片,筛选抗卡那霉素的叶片细胞再生植株,即为T0代转基因植株。T0代转基因植株开花结果,即得T1代种子。问:
如果外源基因是单位点插入到烟草某个染色体上,T1代种子中抗卡那霉素和不抗卡那霉素的分离比为多少抗卡那霉素抗冻,抗卡那霉素不抗冻,不抗卡那霉素抗冻,不抗卡那霉素不抗冻各占多少将若干个抗卡那霉素的种子所萌发的小苗培养至开花结果,分别收集T2代种子T2代种子分成2种情况,有些是整包种子都抗卡那霉素的,有些是出现分离比的,请问前者情况占百分之多少的概率(如果某表型不可能出现,就写占0%)
3:1; 3:0:0:1;1/3
α-干扰素的编码基因没有内含子。为了确定一种免疫缺陷的原因,收集了一些患者和正常人的血样研究其α-干扰素基因的表达状况。下图为关于该基因
的Southern、Northern和western印迹的结果。其中个体1和2具有正常免疫能力,个体3、4和5为免疫缺陷。问: