问答题

什么是蓝白斑筛选为什么蓝白斑筛选也会有假阳性

答案: 质粒上含有lacZ’基因,此基因为lacZ的5’端,编码氨基端;宿主菌中含有lacZ基因的3’端,编码羧基端;二者同时存...
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举两种植物基因转移的方法简述其原理。

答案: (1)Ti质粒介导的基因转移:农杆菌都携带有一种称为Ti的质粒(tumol-inducing plasmid),该质粒上...
问答题

什么是接头连接法人工接头在基因工程中有何用途

答案: 人工合成的一段含有限制性内切核酸酶识别位点的一小段DNA。连接到载体或外源DNA片段上,从而方便地制造出新的酶切位点,便...
问答题

如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成,可以通过何种方法克隆该基因

答案: 简并引物PCR、合成寡核苷酸探针筛选基因组文库或cDNA文库、构建cDNA表达文库利用相应的抗体筛选。
问答题

基因工程的发展主要得益于哪些重大的发现和发明

答案: (1)技术上的三大突破:1970年Smith和Wilcox在流感嗜血杆菌(hatmonphilus influenzae...
问答题

什么是质粒的不亲和性其分子机制如何

答案: 两种质粒不能稳定共存于同一个细胞中的现象。同一不亲和群中的质粒具有相同的复制机制,相互间产生干扰。同时,细胞分裂时细胞质...
问答题

限制性内切酶EcoR Ⅰ的识别序列是GTTAAC;限制性内切核酸酶HaeIII的识别序列是GGCC。每种酶切割双链DNA所得片段的平均长度是多少

答案: GTTAAC的出现频率是46,即4.096kb;GGCC的出现频率是44即0.256kb。
问答题

简述质粒载体的发展改造过程。

答案: 改造质粒的复制特性和可选择性,把选择性标记引入到松弛型质粒中;调整质粒的结构,提高载体的效率,把载体的长度降低到最小,添...
问答题

什么是黏粒为什么它可以克隆大片段外源DNA

答案: 具有cos位点的质粒载体就是黏粒。由于它具有该位点可以被λ噬菌体的包装蛋白包装,从而具有克隆大片段外源DNA的能力。
问答题

简述用基因工程方法培育抗虫棉花新品种的步骤。

答案: 获得目的基因——抗虫基因;把抗虫基因与一定的载体(如Ti质粒)连接形成重组体DNA;转化棉花的细胞;培养出愈伤组织和试管...
问答题

什么是遗传密码子偏好它是如何影响外源基因在宿主细胞中的表达量的

答案: 不同物种中对64种密码子的使用频率有较大的差异称为遗传密码子偏好;很少使用的密码子,在细胞中其相应的tRNA就很少;如果...
问答题

已知某疾病是由于不表达的A基因过量表达引起的。现欲克隆该基因,请你设计一个可操作的实验程序。‘

答案: 提取正常组织和A基因过度表达的组织的mRNA进行差减杂交。
问答题

借助于基因工程技术可以改造生物的某些性状,但在生产实践中,获取高产、抗逆以及优良品质集于一身的超级转基因农作物却非常困难。谈谈你对这一问题的看法。

答案: 原因是多方面的:①目前尚难于对多个基因同时进行转移;②目前尚难于对基因在转基因植株中的位置进行控制;③与高产、抗逆及其他...
问答题

什么是蓝白斑筛选为什么蓝白斑筛选也会有假阳性

答案: 质粒上含有lacZ’基因,此基因为lacZ的5’端,编码氨基端;宿主菌中含有lacZ基因的3’端,编码羧基端;二者同时存...
问答题

当两种限制性内切核酸酶的作用条件不同时,若进行双酶切,应采取何种措施为什么

答案: 用通用缓冲液;先用低盐酶,后用高盐;先低温后高温。
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人们从红色面包霉(Neurospora)中克隆了β-tubulin基因。下图为一大肠杆菌质粒载体pBR的图谱。请你详尽列出从真菌Podospora中克隆同样基因的实验步骤。

 

答案: 把Neurospora的β-tubulin基因标记作为探针。选者在质粒pBR中具有唯一切点的HaeⅡ消化该质粒...
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什么是Klenow酶具有哪些活性简要说明其在基因工程中的用途。

答案: 用枯草杆菌蛋白水解酶处理DNA聚合酶Ⅰ,得到一个大的片段,具有3’→5’外切酶活性和5’→3’聚合酶活性,失去了5’→3...
问答题

如何利用脉冲场凝胶电泳技术对已经克隆的基因进行染色体定位

答案: 电泳后,利用放射性同位素或地高辛或生物素标记已克隆的基因作为探针进行Southern印迹。
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形态标记(morphological marker)和分子标记(molecular marker)都可用于基因定位,简要说明利用这两种标记进行基因定位的基本步骤。

答案: ①收集不同的患者家系(人类中)或进行一定的杂交(测交或自交,动植物中);②分析多个形态标记或分子标记与目的基因的遗传规律...
问答题

cDNA文库和基因组文库有何区别

答案: 前者不含内含子,后者有。前者仅是部分结构基因的克隆,后者包含了基因组的全部信息。
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什么是密码子偏爱它是如何影响外源基因表达水平的

答案: 不同物种中对64种密码子的使用频率有较大的差异称为遗传密码子偏好;很少使用的密码子,在细胞中其相应的tRNA就很少;如果...
问答题

什么是辅助噬菌体它和相应的噬菌粒是如何协同工作的

答案: 在主要基因间隔区含有突变,使得自身DNA复制效率低下的一类噬菌体突变体。但它们可以为寄主中噬菌粒的复制与包装提供蛋白酶与...
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简述双脱氧链终止法测定DNA碱基序列的原理。根据下列图谱给出被测定链的基因序列和方向。

 

答案: 正常的体外合成体系中,DNA聚合酶在引物的引导下,沿模板链的3’→5’方向移动,利用体...
问答题

假设你已经把玉米中一个与光合成有关的蛋白质基因克隆到了质粒载体中。希望知道该基因是否在根和其他非光合组织中起作用,请提出你的实验方案。

答案: ①把已经克隆的基因经标记作为探针使用。从根或其他非光合组织中提取RNA进行Northem印迹。②设计特异引物,从根或其他...
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普通PCR与随机引物PCR(RAPD)有何区别

答案: ①引物不同。普通PCR为双引物,且较长20bp左右;RAPD用单引物且较短,10bp左右;②复性温度不同。普通PCR较高...
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基因D编码一个对肌肉发育十分重要的酶。以下为对两个小孩的研究结果。
小孩1:

小孩2:

你如何解释小孩2酶活低的原因。

答案:

基因的表达正常,但活性大大降低,说明可能发生了突变,从而影响酶活性。

问答题

基因D编码一个对肌肉发育十分重要的酶。以下为对两个小孩的研究结果。
小孩1:

小孩2:

你如何解释两个小孩Southern杂交结果的差异

答案: 基因D发生了一个点突变,碱基序列的改变产生了一个新的酶切位点,可以被XhoⅠ识别和消化。使得个体2的Southern杂交...
问答题

简要说明PCR技术的工作原理并举几例说明该技术在分子生物学不同研究内容中的应用。

答案: (1)基本原理:在高温下使DNA变性成为单链;在较低的温度下引物与单链DNA在互补位置结合,形成复合物。把温度调节到DN...
问答题

某一显花植物的隐性矮秆突变体是由于基因缺失造成的。试设计一可操作的实验方案克隆它的野生型基因。

答案: 把正常植株的基因组DNA与隐性矮秆植株的基因组DNA进行差减杂交。
问答题

YAC载体上具有什么样的功能性DNA序列

答案: 复制起点、着丝粒和端粒。具有克隆数百kb碱基对DNA的能力。因此,利用它作载体构建基因文库可以显著减少克隆的数目,降低在...
问答题

简单比较Sotlthern印迹、Northern印迹、Western印迹和点印迹的区别和用途。

答案: Southern杂交用于检测待测DNA样品中是否含有与探针同源的DNA片段和大小。
Northern杂交用于检...
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什么是限制性内切核酸酶的星号活力它受哪些因素的影响

答案: 酶切条件的改变会对限制性内切核酸酶的专一性造成影响,识别序列和切割都有一些变化,改变后的活性就是星号活力。诱发因素包括:...
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什么是测序酶(sequenase)

答案: 采用缺失的方法,使野生型的酶失去3’→5’外切酶活性,保留聚合酶活性,聚合能力提高了数倍。属于序列测定专用酶。
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