何谓PCR？试述PCR技术的基本原理和影响因素。

问答题何谓PCR？试述PCR技术的基本原理和影响因素。

1.问答题简述Sanger DNA测序法的原理。

2.多项选择题下列哪些是Southern印迹法的步骤（）。

A.用限制酶消化DNA
B.DNA与载体的连接
C.用凝胶电泳分离DNA片段
D.DNA片段转移至硝酸纤维素膜上
E.用一个标记的探针与膜杂交

3.多项选择题分子克隆中常用的标记方法有（）。

A.缺口平移法
B.随机引物法
C.末端标记法
D.T4DNA聚合酶标记法
E.以上都是

4.多项选择题分子克隆中常用的标记物有（）。

A.生物素
B.地高辛
C.荧光素
D.同位素
E.辣根过氧化物酶

5.多项选择题DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述（）。

A.哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的
B.依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少
C.是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值
D.可通过碱基在260nm的特征吸收蜂的改变来确定
E.就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度

6.多项选择题双链DNA中的碱基对有（）。

A.A─U
B.G─T
C.C─G
D.T─A
E.C─A

7.多项选择题基因诊断的基本方法有（）。

A.核酸分子杂交
B.PCR和SSCP（PCR-SSCP）
C.限制酶酶谱分析
D.DNA序列测定
E.DNA芯片技术

8.多项选择题预杂交的主要目的是（）。

A.平衡滤膜
B.封闭非特异性杂交的位置
C.提高杂交信号的检测效率
D.便于从滤膜上去除探针
E.清除用于杂交反应检测的显色物质

9.多项选择题整个杂交反应主要以下哪些步骤组成（）。

A.预固定
B.杂交
C.洗脱
D.固定
E.转移

10.多项选择题基因芯片的支持介质可以是（）。

A.硝酸纤维素膜
B.玻片
C.尼龙膜
D.琼脂糖
E.聚丙烯膜