试述载体构建一般方法。_考试资料网

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问答题试述载体构建一般方法。

参考答案： A.目的基因分析（1）ORF 分析（2）酶切位点分析。
B.载体选择与分析（1）多克隆位点分析（2）...

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1.问答题如何有效地提高外源基因的表达效率？

参考答案：⑴提高启动子强度。
⑵缩短启动子同克隆基因间距离。
⑶高效的翻译起始序列。
⑷高效的转录终...

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2.问答题基因工程诞生的理论基础是什么？

参考答案：是现代分子生物学领域理论上的三大发现和技术上的三大发明。理论上的三大发现：
1.证实了DNA是遗传物质。

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3.问答题核酸操作的基本技术有哪些？

参考答案：①核酸提取与纯化②核酸的检测与保存③核酸的凝胶电泳④核酸分子杂交。

4.问答题限制性核酸内切酶的活性受哪些因素影响？

参考答案：⑴酶的纯度。
⑵DNA样品的纯度。
⑶DNA的甲基化程度。
⑷酶切反应的温度与时间。

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5.问答题什么是α-互补筛选？

参考答案：质粒载体具有β-半乳糖苷酶基因（lacZ），当外源DNA插入到它的lacZ，可造成表达后的β-半乳糖苷酶失活，利用这一点...

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6.问答题什么是包涵体？

参考答案：重组蛋白在胞内表达时，常常以不溶性蛋白聚集成的晶状物形式存在，这种晶状体即包涵体。包涵体的形成是外源蛋白的高效表达时的普...

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7.名词解释MCS

参考答案：指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的DNA片段。

8.名词解释穿梭质粒载体

参考答案：指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记，因而可在两种不同宿主细胞中存活和复制的质粒载体。

9.名词解释S-D序列

参考答案：在大肠杆菌mRNA的核糖体结合位点上，含有一个转译起始密码子及同16S核糖体RNA3，末端碱基互补的序列，该序列最初由S...

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10.名词解释基因文库

参考答案：通过克隆方法保存在适当宿主中的某种生物，组织，器官或细胞类型的所有DNA片段而构成的克隆集合体。