以某一序列已知的真核生物基因为例，如编码动物激素的基因，使其在E.coli中...

问答题以某一序列已知的真核生物基因为例，如编码动物激素的基因，使其在E.coli中表达简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。

1.问答题已知目的的cDNA序列，拟采用基因工程技术使其在哺乳细胞中表达，请写出设计方案。

2.问答题你在做Southern印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案，下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶，使DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自影片是空白。错在哪里？试分析其原因。

3.问答题现在对人类基因组的主要研究工作是进行基因组的序列测定。然而，有人根据人类基因组是由重复序列组成为由，认为反复对同一种DNA进行测序是不明智的。你能否拟定两份计划，一份计划应保证仅仅单一序列DNA被测序，第二个计划应允许仅仅转录的单一DNA序列被测序。请简述你的两份计划。

4.问答题建立了一个基因文库后，如何鉴定一个携带目的基因的克隆？

5.问答题试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。

6.问答题影响PCR结果的因素有哪些？

7.问答题cDNA芯片在医学中的应用？

8.问答题简述基因表达谱芯片的原理？

9.问答题影响PCR扩增平台期的因素有哪些？

（1）引物及dNTP底物浓度降低；
（2）酶与模板比例下降。

10.问答题PCR引物设计的原则主要有哪些？