A.不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B.同聚尾法连接不仅连接效率高,也易回收插入的片段。
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接。
D.Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
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A.其核心是利用末端转移酶的功能,将载体和外源DNA的3‘端再加上一端寡核苷酸。
B.不易自身环化。
C.连接效率高
D.适用于CDNA克隆
E.可能会产生某种限制酶切位点。
A.避免载体自身环化
B.提高连接效率
C.控制外源基因的插入方向
D.便于转化后的筛选
E.便于修改阅读框
A.引入某些限制酶切位点。
B.人工构建载体。
C.增加调控元件。
D.调整阅读框。
E.通过接头引入与目的基因相同的限制酶位点,并对目的基因相应酶切点进行甲基化修饰保护,可保护目的基因不受限制酶破坏。
A.平末端连接
B.粘末端连接
C.加接头连接
D.同聚尾连接
E.T载体连接
A.Mg2+
B.BSA
C.ATP
D.PO43-
E.EDTA
A.可产生新的酶切位点
B.载体易自身环化
C.易于回收片段
D.具有方向性
E.选时更简便
A.65℃处理10分钟使BamHI灭活。
B.用碱性磷酸酶处理载体防止其自身环化。
C.电泳检测酶切结果。
D.A、B、C都正确。
E.只有A、C正确。
A.单酶切产物
B.双酶切产物
C.同裂酶产物
D.PCR产物
E.酶切后形成的平末端产物
A.核酸内切酶
B.核苷酸激酶
C.核酸外切酶
D.末端转移酶
E.碱性磷酸酶
A.同等条件下连接效率高于粘末端连接的连接效率。
B.加入凝聚剂PEG8000可促进平末端连接。
C.平末端连接时反应温度要比粘末端连接温度高。
D.平末端连接方法的使用仅限于酶切后产生的两个平末端之间的连接。
E.平末端连接比粘末端连接更易产生自身环化。
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