A.确定引物能够唯一匹配目标基因B.预测是否会产生非特异性扩增C.确定会不会产生引物二聚体D.预测会不会出现引物二级结构E.预测引物设计的特异性
A.如果存在基因组污染,那么扩增产物会有两条带B.基因组DNA扩增不出来C.可以排除基因组污染带来的影响D.可以避免引物二聚体的形成E.可以减少引物自身产生二级结构
A.选定实验的目标物种B.目标片段是否能够100%匹配C.与其它序列比对发生部分互补时注意观互补的位置D.实际的PCR引物是否合理需要试验验证E.如果非特异性序列于引物的5’端互补则出现非特异性扩增的概率大于于3’端互补