什么是细菌的限制—修饰系统？（restriction-modificatio...

问答题什么是细菌的限制—修饰系统？（restriction-modificationsystem，R-Msystem）

1.问答题用 Klenow 酶填补的办法可使 5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使 DNA 上的某些限制酶的识别位点消失。请问，对于下列限制酶，用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失？BamH I（G↓GATCC）； Taq I（T↓CGA），BssHⅡ（G↓CGCGC）。

2.问答题用连接酶将 Sau 3AI（，bGATC）切割的 DNA与经 BamHI（G↓’GATCC）切割的 DNA连接起来后，能够被 BamHI 切割的机率有多大（用百分比表示）？

3.问答题下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT， GATATC，ACGGCA？为什么？

（1） GATATC；AAATUF；
（2）因为它们是回文序列。

4.问答题在序列 5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个 6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？

5.问答题某学生在用 EcoRI切割外源 DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？

6.问答题有些噬菌体和质粒常常编码一些抗限制性酶的蛋白以中和宿主的限制系统。你认为噬菌体和质粒还有哪些可能的方式避免宿主的限制作用？

7.问答题Fredrick 和 McClarin等用一个由 13 个碱基对的 DNA片段与 EcoRI、反应，然后分离到酶和 DNA 共结晶的复合物，通过 X射线分析发现了什么？

8.问答题在酶切反应缓冲液中加入 BSA的目的是什么？机理是什么？

目的是保护酶活性，机理是通过提高溶液中蛋白质的浓度，防止酶失活。

9.问答题说明 SangerDNA 测序法的原理。

10.问答题现分离到 X82 噬菌体的一个突变型，它同野生型的噬菌斑相当不同，并已分离到这两种噬菌体的 DNA，请设计一个实验，初步鉴定是点突变、插入突变还是缺失突变？