如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为...

问答题

在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tet^R的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。

如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样的杂交带？

参考答案： 除 No.2 的2.5kb，No.6 的1.5kb 和1.0kb 没有带外，其他都有带。

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1.问答题 在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tet^R的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。

绘制含有插入片段和不含插入片段时的 pBPl 的限制性图谱，并标明四环素抗性基因的位置；

参考答案：

2.问答题计算下列三种酶各自在某染色体 DNA 序列上识别位点间的平均距离：

参考答案：

3.填空题DNA连接酶的单位通常用 Weiss 单位表示，一个 Weiss单位是：（）。

参考答案：在37℃下20分钟内催化焦磷酸交换1nmol32p到ATP所需要的酶量

4.填空题原核生物主要有两种类型的 DNA连接酶：E．coliDNA连接酶和 T4DNA 连接酶。基因工程中使用的主要是 T4DNA连接酶，它是从 T4 噬菌体感染的 E．coli 中分离的种单链多肽酶，分子量为——』Oa，由 T4 噬菌体基因——编码。E．coli DNA连接是由大肠杆菌基因一编码，也是一条多肽链的单体，分子量为（）kDa。这两DNA 连接酶有两个重要的差异：第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同，TDNA连接酶用（），而 E．coli DNA连接酶则用（）作为能源。第是它们催化平末端连接的能力不同，在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端E．coliDNA连接酶则不能。即使是调整反应条件，E．coli DNA连接酶催化平末端连接效率也只有 T4 DNA连接酶的（）。

参考答案：68、30、51、74；ATP；NAD；1／100

5.填空题连接酶（ligase）是一类用于核酸分子连接形成（）键的核酸合成酶，有DNA连接酶RNA连接酶之分。

参考答案：磷酸二酯

6.名词解释限制性物理图谱

参考答案：即限制性内切核酸酶作图(restriction mapping)。简单地说就是 DNA分子中限制性内...

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7.问答题据 Science 杂志报道：一种重要的遗传疾病可由导致 DNA中碱基替换的诱变剂在体外进行人工诱导。设计一种快速用以鉴定疾病基因型的检测方法。

参考答案：这要求基因座已被作图，其目的在于分离基因，测定核苷酸序列以及确定是否碱基替换突变。碱基替换突变可以改变 DNA...

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8.问答题为什么大多数内切酶被称为“限制”酶。

参考答案： 大多数内切核酸酶是限制性的内切核酸酶，只在特定的位点(即一段特定的核酸序列或甲基化核苷酸)作用。另外，限制性内切核酸酶...

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