简述 DNA和 RNA连接酶的催化反应机制。

问答题简述 DNA和 RNA连接酶的催化反应机制。

1.问答题1967 年，有5个实验室几乎同时独立发现了 DNA 连接酶，每个实验室的实验有什么特点？

2.问答题核酸酶与外切核酸酶Ⅲ用于系列缺失突变有什么不同？

3.问答题切口移位（nick translation）标记DNA前，用 DNaseI处理 DNA时，应注意什么？

应注意Mg²⁺离子浓度和处理时间及温度。

4.问答题RNaseA和 RNaseH在催化活性和应用上有何不同？

5.问答题基因工程中，为什么不喜欢用 BAP来脱去 DNA的 5’端的磷酸基团？

因为 BAP耐热和耐酚抽提。

6.问答题什么是 S1 核酸酶作图（S1nucleasemapping）？

S1 核酸酶作图是一种对 RNA转录产物的末端和剪接位点进行作图的方法。

7.问答题什么是测序酶（sequenaseTM）？

8.问答题按适当的顺序，列出将一种 mRNA的 cDNA 克隆到表达载体所用到的酶。

9.单项选择题可以在切口部位起作用的酶是（）。

A. S1核酸酶
B.外切酶Ⅲ
C. λ外切核酸酶
D.Bal31核酸酶

10.单项选择题下列DNA不是λ外切核酸酶作用底物的是（）。

A.具有3’突出端的双链 DNA
B.具有5’突出端的双链 DNA
C.切口DNA
D.平末端 DNA