说明变性定位法和限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点的原理。

问答题说明变性定位法和限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点的原理。

1.问答题什么是质粒的带动转移？

2.问答题什么是复制子（replicon）？

3.问答题用加有注释的图表说明 F质粒是怎样从一个F⁺细胞转移到F^—细胞。并简要说明转移复制如何不同于营养体的复制。

4.问答题 你能用哪一种基因转移的方法确定下列位置。
（1）E．coli 染色体上一个新发现的基因座在其染色体上的位置；
（2）一个新分离的突变在基因内的位置。

（1）Hfr转化和中断接合；
（2）转导。

5.问答题你已经分离了一个新的 F’因子，怎样用最简便的方法知道最初的 F因子的部分 DNA已经被切除，并被一个外源DNA（也就是细菌DNA）所替代？

6.问答题怎样从一个 E．coli的 Hfr 菌株中分离到一个 F ’^gal＋的菌株？

7.问答题解释为什么不同的 Hfr 菌株具有不同的转移起点和方向？

8.问答题为什么来自 Hfr×F^－的重组体几乎总是F^－？

9.问答题虽然质粒的带动转移给质粒载体的安全性带来一定的困难，但是通过带动转移将质粒转移到特定的受体菌中也是基因工程中常用的实验技术。请举一例说明之。

10.问答题说明减少质粒和噬菌体载体上某种酶的识别位点的方法和原理。

质粒：体外诱变或体内诱变（通过具有限制性作用的宿主）。
噬菌体：体外诱变。