何谓简并引物（degenerate primer）？_考试资料网

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问答题何谓简并引物（degenerate primer）？

参考答案： 所谓简并引物是指根据肽链的氨基酸序列(或部分序列)，并充分考虑密码子的简并性而设计的、用于 PCR ...

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1.问答题采用什么措施保证 DNA化学合成的定向性和专一性？

参考答案：（1）将不必进行反应的基团保护起来，这样可保证定向；
（2）每一循环之后，清除多余的单核苷酸，并将未反应的固着...

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2.问答题说明溴化乙锭—氯化铯密度梯度离心纯化 DNA 的原理。

参考答案：它的基本原理有以下三点：
（1）氯化铯是一种高分子量的重金属，在一定的高速离心下，可以自动形成氯化铯的浓度梯度...

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3.问答题在 DNA 分离过程中，酚通常与氯仿联合使用，即使不联合使用也要在苯酚抽提后用氯仿再抽提一次，为什么？

参考答案：原因是酚和水有一定程度的互溶，所以单独使用酚抽提DNA，最终不能除去酚，残留的酚会使起切割和连接作用的限制性内切核酸酶和...

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4.问答题为什么氧化变色的酚不能直接用于 DNA的分离？应如何处置？

参考答案：因为苯酚与空气接触氧化成粉红色的醌。苯酚氧化生成的醌能够形成游离的自由基，这种自由基能够引起磷酸二酯键的断裂，造成...

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5.问答题为什么苯酚要重蒸饱和后才能用于 DNA的分离？

参考答案：由于苯酚呈酸性，并且常常会氧化产生自由基，直接用于DNA的分离，会使DNA遭到破坏，所以，用前需要重蒸除去氧化物，然后用...

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6.问答题为什么从细胞中分离 DNA时往往会断裂？

参考答案：（1）细胞内存在很高的核酸酶活性，DNA 裸露后，很容易遭到核酸酶的降解；
（2）在分离 DNA的过程中，要用...

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7.问答题用于克隆的 DNA在质量上有什么要求？

参考答案：（1）首先是稳定性：保持 DNA的高分子量和原有的构型；
（2）低蛋白质含量；
（3）DNA样品中应...

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8.问答题假定你从黏质沙雷氏菌中克隆了一个基因，并推测可能是依赖于锌的金属蛋白酶，因为它含有两个组氨酸和一个谷氨酸与锌形成锌指结构。请你设计一个方案，改变其中一个组氨酸看看是否改变蛋白酶的活性？

参考答案：通过定点突变改变一个组氨酸。

9.问答题溶菌酶是破碎细菌细胞的有效方法。但有些细菌的孢子对溶菌酶不敏感，应该如何处理？

参考答案：添加DTT、β—巯基乙醇，或8.0mol／L的尿素等增加敏感性。

10.问答题分离pBR322 DNA可考虑用氯霉素扩增，分离 pUCl8质粒 DNA则不必用氯霉素扩增，为什么？

参考答案：pUCl8的拷贝数可达 500—700，即使扩增到 3000，也只扩大 5—6倍。但是，菌...

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