一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的Eco...

问答题一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母 DNA 连接后转化对两种抗生素都敏感的 E.coli 菌株。（1）利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞？（2）怎样区分接受了插入酵母 DNA的质粒的克隆？

（1）选择Amp^r的转化子；
（2）所需的克隆是Amp^r和Kan^r。任何能够抗这两种药物的克隆都是自连的非重组质粒。

1.问答题插入失活和插入表达法筛选重组体的主要差别是什么？

2.问答题切口移位（nick translation）标记探针的主要步骤有哪些？

3.问答题你在做Southern 印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案，下面一步骤是用 NaOH溶液浸泡凝胶，使 DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。错在哪里？

4.问答题点印迹与Southern 印迹相比，有何优点和缺点？

5.单项选择题下列筛选重组体的方法中，不属于遗传学的方法是：（）。

A.插入失活法
B.显色反应选择法
C.噬菌斑选择法
D.R 环分析法

6.单项选择题关于噬菌斑筛选法的原理，下面哪一种说法不正确？（）

A.噬菌斑颜色变化
B.cⅠ基因失活造成的噬菌斑的变化
C.对 IPTG的分解能力
D.对X-gal 的分解与否

7.单项选择题要对一双链的 DNA分子进行 3’末端标记，可用（）。

A.Klenow酶
B.DNA聚合酶 I
C.T4DNA聚合酶
D.T7DNA 聚合酶

8.单项选择题在切口移位标记 DNA探针时只能使用（）。

A.Klenow酶
B.DNA聚合酶 I
C.DNA聚合酶Ⅱ
D.DNA 聚合酶Ⅲ

9.单项选择题随机引物标记探针，下列各项中哪一项是不正确的？（）

A.双链DNA 单链 DNARNA 都是可以标记的
B.不需要用 DNaseI预处理
C.反应时可用 Klenow 酶
D.反应时可用 DNA 聚合酶Ⅰ

10.单项选择题Southern 印迹是用 DNA探针检测 DNA片段，而 Northern 印迹则是：（）。

A.用 RNA探针检测 DNA片段
B.用RNA探针检测 RNA片段
C.用 DNA探针检测 RNA片段
D.用 DNA探针检测蛋白质片断