在DNA分子克隆时，常用到部分填补法，填补时应注意（）

单项选择题在DNA分子克隆时，常用到部分填补法，填补时应注意（）

A.控制反应温度
B.控制酶的反应时间
C.控制DNA聚合酶的用量
D.控制反应PH
E.限制dNTP的种类

1.单项选择题DNA回收时，如要除去EB（溴化乙锭）可用下列那种试剂（）

A.正丁醇
B.苯酚
C.氯仿
D.异戊醇
E.乙醇

2.单项选择题在回收DNA片段时，观察电泳结果为尽量减少对DNA的照射损伤应使用（）

A.长波长紫外
B.短波长紫外
C.长波长红外
D.短波长红外
E.ABCD都不可

3.单项选择题用透析膜插片凝胶电泳法回收DNA片段时，再区带前挖一小槽，将透析膜置于槽中，这时应注意（）

A.透析膜要接触DNA区带一侧的胶缘。
B.透析膜不能接触DNA区带一侧的胶缘。
C.透析膜要接触DNA区带相对一侧的胶缘。
D.透析膜不能接触DNA区带相对一侧的胶缘。
E.随意插入槽中即可。

4.单项选择题用DEAE膜片法回收电泳分离的DNA片段时，在紧靠目的DNA片段前方的凝胶切一裂缝，以插入DEAE纤维素膜，该裂缝长度与DNA条带相比应（）

A.略短
B.等长
C.略长
D.A或B都可
E.A、B、C都可

5.问答题当两种限制酶反应条件不同时，若要用双酶切，应采取什么措施？为什么？

6.问答题如果用EcoRI酶切DNA时出现星活性，试分析原因？

主要原因有：酶浓度太高；高PH；低盐；含Mn2+、Cu2+等非Mg2+金属离子；甘油浓度高于5%；存在某些有机溶剂。

7.问答题在酶切缓冲液中加入牛血清白蛋白（BSA）的目的与机理是什么？

目的是保护酶的活性；机理是通过提高反应体系中蛋白质的浓度，防止内切酶失活。

8.填空题限制与修饰是宿主的一种保护体系，它是通过对外源（）的限制和对自身DNA的修饰来实现的。

9.填空题甘油浓度是导致一些酶的星活性的原因之一，在酶切时反应体系中的甘油浓度应控制在（）以下。

10.填空题限制性内切酶通常保存在（）浓度的甘油溶液中。