基因工程操作的基本步骤是：①（）；②（）；③（）；④（）。

有人设想将羊体细胞与牛体细胞进行融合，以获得新物种“羊一牛”，你认为依据目前的生物技术和理论能否实现这一构思？你的理由是什么？

在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种（）、四种脱氧核苷酸和（）的DNA聚合酶。

若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？说明理由。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？

④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？理由是什么？

在形成图中③的过程中，获取②的途径主要有从基因文库中获取、（）、人工合成。

操作步骤：从人的（）获取目的基因；目的基因与（）结合构建基因表达载体；在基因表达载体中还应插入（）和终止子。然后把基因表达载体导入牛的（），通过发育形成的牛体细胞含人的（），成熟的牛产的的奶中含有（），证明基因操作成功。

述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往有很多植株不再具有抗虫性，原因是（），要想获得纯合体，常采用的方法是（）。

图中的III是导入了目的基因的受体细胞，经培养、筛选最终获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交产生的F1中，仍具有抗虫特性的植株占总数的（），原因是（）。

如图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。简述重组质粒的主要过程包括：①（）；②（）；③（）。