在此图过程中用到的基因操作工具分别是（）。

填空题

重症联合性免疫缺陷病是一种体液免疫、细胞免疫同时有严重缺陷的疾病（简称SCID），这种患者缺乏正常的人体免疫功能，只要稍被细菌或病毒感染，就会发病死亡。经研究证实，SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶（简称ADA）的基因ada发生了突变。目前，人们已经找到了治疗该疾病的方案。如下图：

在此图过程中用到的基因操作工具分别是（）。

参考答案： 限制性核酸内切酶、DNA连接酶、运载体

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1.单项选择题 重症联合性免疫缺陷病是一种体液免疫、细胞免疫同时有严重缺陷的疾病（简称SCID），这种患者缺乏正常的人体免疫功能，只要稍被细菌或病毒感染，就会发病死亡。经研究证实，SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶（简称ADA）的基因ada发生了突变。目前，人们已经找到了治疗该疾病的方案。如下图：

下列不是运载体必须具备的是（）

A．能在宿主细胞中复制并保存
B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接
C．具有标记基因，便于进行筛选
D．是环状形态的DNA分子

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2.填空题 2N/4N嵌合体胚胎是指用四倍体（4N）胚胎与二倍体胚胎（2N）或胚胎干细胞（ES细胞）进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2N/4N嵌合体胚胎的构建常用方法如下图，请据图分析回答：

2n/4n嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有：（）。

参考答案：动物细胞的培养、动物细胞融合和胚胎移植

3.填空题 2N/4N嵌合体胚胎是指用四倍体（4N）胚胎与二倍体胚胎（2N）或胚胎干细胞（ES细胞）进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2N/4N嵌合体胚胎的构建常用方法如下图，请据图分析回答：

2N的ES细胞来自胚胎发育过程的（）期，本实验中从功能上说明了该细胞（）。

参考答案：囊胚；具有发育的全能性

4.填空题 2N/4N嵌合体胚胎是指用四倍体（4N）胚胎与二倍体胚胎（2N）或胚胎干细胞（ES细胞）进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2N/4N嵌合体胚胎的构建常用方法如下图，请据图分析回答：

受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞达到（）时期，才具备受精的能力，而精子需经过（）过程才能和卵细胞结合。

参考答案：减数第二次分裂中期；精子获能

5.填空题“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：在研究中如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚期的（），或胎儿的原始性腺，也可以通过（）技术得到重组细胞后在进行相应处理获得。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是（）。

参考答案：内细胞团；核移植；原肠胚

6.填空题“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：如果要获取人类基因组中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括（）和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以采用（），该技术中需使用的一种特殊的酶是（）。

参考答案：从基因文库；PCR；Taq酶

7.填空题“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的（）。检测P53基因的表达产物，还可以采用（）技术。

参考答案：复制原点；抗原---抗体杂交法

8.填空题登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。科学家用以下方法控制病毒的传播。
将S基因分别插入到A、B基因的紧邻位置（如图），将该纯合的转基因雄蚊释放到野生群体中，群体中蚊子体内病毒的平均数目会逐代（），原因是（）。

参考答案：减少；S基因表达的S蛋白会抑制登革热病毒复制

9.填空题登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。科学家用以下方法控制病毒的传播。
科学家获得一种显性突变蚊子（AABB）。A、B基因位于非同源染色体上，只有A或B基因的胚胎致死。若纯合的雄蚊（AABB）与野生型雌蚊（aabb）交配，F₁群体中A基因频率是（），F₂群体中A基因频率是（）。

参考答案：50%；60%

10.填空题登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。科学家用以下方法控制病毒的传播。将S基因转入蚊子体内，使蚊子的唾液腺细胞大量表达S蛋白，该蛋白可以抑制登革热病毒的复制。为了获得转基因蚊子，需要将携带S基因的载体导入蚊子的（）细胞。如果转基因成功，在转基因蚊子体内可检测出（）、（）和（）。

参考答案：受精卵；S基因、由S基因转录的mRNA；S蛋白