双酶消化法（doubledigests）绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。

问答题双酶消化法（doubledigests）绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。

1.问答题什么是限制性内切核酸酶的星号活性？受哪些因素影响？

2.问答题何谓限制性内切核酸酶的切割频率？

3.问答题Ⅲ类限制酶有哪些特点？

4.问答题I类限制酶具有哪些特点？在基因工程中有什么作用？

5.问答题细菌的限制—修饰系统有什么意义？

6.问答题什么是细菌的限制—修饰系统？（restriction-modificationsystem，R-Msystem）

7.问答题用 Klenow 酶填补的办法可使 5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使 DNA 上的某些限制酶的识别位点消失。请问，对于下列限制酶，用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失？BamH I（G↓GATCC）； Taq I（T↓CGA），BssHⅡ（G↓CGCGC）。

8.问答题用连接酶将 Sau 3AI（，bGATC）切割的 DNA与经 BamHI（G↓’GATCC）切割的 DNA连接起来后，能够被 BamHI 切割的机率有多大（用百分比表示）？

9.问答题下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT， GATATC，ACGGCA？为什么？

（1） GATATC；AAATUF；
（2）因为它们是回文序列。

10.问答题在序列 5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个 6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？