一个十肽的氨基酸分析表明其水解液中存在下列产物：
NH⁴⁺    Asp    Glu     Tyr     Arg Met     Pro     Lys     Ser     Phe 并观察下列事实：
（1）用羧肽酶A和B处理该十肽无效；
（2）胰蛋白酶处理产生两个四肽和游离的Lys；
（3）梭菌蛋白酶处理产生一个四肽和一个六肽；
（4）溴化氢处理产生一个八肽和一个二肽，用单字母符号表示其序列为NP；
（5）胰凝乳蛋白酶处理产生两个三肽和一个四肽，N-末端的胰凝乳蛋白酶水解肽段在中性pH时携带-1净电荷，在pH12时携带-3净电荷；
（6）一轮Edman降解给出下面的PTH衍生物：写出该十肽的氨基酸序列。

一个多肽可还原为两个肽段，它们的序列如下：链1为Ala-Cys-Phe-Pro-Lys-Arg-Trp-Cys-Arg- Arg- Val-Cys；链2为Cys-Tyr-Cys-Phe-Cys。当用嗜热菌蛋白酶消化原多肽（具有完整的二硫键）时可用下列各肽：（1）（Ala、Cys2、Val）；
（2）（Arg、Lys、Phe、Pro）；
（3）（Arg2、Cys2、Trp、Tyr）；
（4）（Cys2、Phe）。
试指出在该天然多肽中二硫键的位置。

某多肽的氨基酸序列如下：Glu-Val-Lys-Asn-Cys-Phe-Arg-Trp-Asp-Leu-Gly-Ser-Leu-Glu- Ala-Thr-Cys-Arg-His-Met-Asp-Gln-Cys-Tyr-Pro-Gly-Glu_Glu-Lys。
（1）如用胰蛋白酶处理，此多肽将产生几个肽？并解释原因（假设没有二硫键存在）；
（2）在pH7.5时，此多肽的净电荷是多少单位？说明理由（假设pKa值：α-COOH4.0；α- NH3+6.0；Glu和Asp侧链基4.0；Lys和Arg侧链基11.0；His侧链基7.5；Cys侧链基9.0；Tyr侧链基11.0）；
（3）如何判断此多肽是否含有二硫键？假如有二硫键存在，请设计实验确定5，17和23位上的Cys哪两个参与形成？