原生质体融合技术包括哪些步骤。

简述两级冷却加热空气净化流程。

生物细胞载体培养法中，用作载体的取材必须经得起蒸汽加热杀菌，具有多孔结构使有足够的表面积，又能允许空气流通。

过滤介质捕捉空气中微粒与空气流速有密切关联，当空气流速低于某一数值时，微粒的捕获效率随空气流速下降而增高，这种拦截微粒的机理是拦截滞留作用。

简述化学消泡和机械消泡的特点。

种子培养期应严格控制种子污染，当发现种子受到杂菌污染，应灭菌后弃去，并对种子罐、管道进行检查和彻底灭菌。

发酵前期主要是菌体生长繁殖，产物生成很少，此期容易染菌，污染后杂菌迅速繁殖，与生产菌争夺营养和氧分，严重干扰生产菌的生长繁殖和产物的生成，因此特别防止发酵前期染菌。

发酵工艺过程中，种子的接种量大小主要取决于微生物的生长繁殖速度，细菌的接种量一般为1%，生长较慢的真菌的接种量可达10%。

当发现发酵前期污染杂菌时，由于营养成分消耗不多，因此一般采取的措施是继续发酵，直至发酵结束。

在疫苗深层发酵培养过程中，一旦受污染，无论是制备活菌还是死菌疫苗，都应全部废弃。